如何确认模板中是否含有阻害物质-技术资料-华瑞-华瑞生物

产品选择指南

逆转录试剂盒

Fast Universal Reverse Transcription Kit (with DNase) Fast Reverse Transcription SuperMix for qPCR(with DNase) Fast Reverse Transcription SuperMix for qPCR
qPCR

2× Super SYBR Green qPCR Mix (with ROX2) 2× Super SYBR Green qPCR Mix (with ROX1) 2× Super SYBR Green qPCR Mix

如何确认模板中是否含有阻害物质

有时Total RNA或cDNA中含有对反转录反应和PCR反应的阻害物质（如RNA提取时使用的有机溶剂等）。为了确认这样的阻害物质的有无，使用较高浓度的模板按3～4个梯度稀释，并使用其进行Real Time RT-PCR反应或Real Time PCR反应。如果无阻害物质存在，得到的Ct值会依存模板浓度的变化而变化；如果有阻害物质存在，就会发现高浓度的模板有反应性能下降的现象。使用Trizol法提取RNA时容易残留阻害物质，而离心柱法提取的RNA纯度较高，建议有条件的实验室使用试剂盒进行RNA的提取。